产品货号：
WH0018
中文名称：
广谱基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)
英文名称：
Extraction kit for genomic DNA from blood/cell/tissue
产品规格：
50次|200次
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本试剂盒适用于小体系全血（≤1ml）、培养细胞和动物组织等基因组DNA的广谱性提取试剂盒。试剂盒采用了独特的细胞裂解体系，使蛋白变性，结合硅胶膜特异吸附核酸的原理，快速纯化得到基因组DNA。使用本试剂盒纯化所得的DNA无蛋白、核酸酶污染，可直接进行PCR、酶切和Southern杂交等实验操作。
产品特点：
·简单快速：1h内即可获得超纯的基因组DNA。
·广泛：适用于血液、多种动物细胞和动物组织等。
·超纯：获得的DNA纯度高，可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。
材料用量和纯化核酸得率：
组织匀浆以及裂解充分图例：
组织取样量图例：
试剂盒组成：
保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。
选配试剂：红细胞裂解液（Red Cell Lysis Buffer目录号：WH0229)；RNase A（100mg/ml）（目录号：WH0217）
注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇。
2．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3．若缓冲液GA或GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
4．所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。
使用方法：
使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1．处理材料
a．如提取材料为血液，可直接使用200μl新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液，不足200μl可加缓冲液GA补足；
注意：如需处理更大体积血液，如300 μl-1 ml，应按以下步骤操作：在样品中加入3倍体积红细胞裂解液（例如，300 μl血液加入900 μl红细胞裂解液），颠倒混匀，室温放置5 min，期间再颠倒混匀几次。10000rpm（~11500×g)离心1 min（若离心机最高转速不允许，可3000 rpm（~3400×g)离心5 min），吸去上清，留下白细胞沉淀，加200μl缓冲液GA，振荡至彻底混匀。
红细胞裂解液本公司另外有售（目录号：WH0229），可根据需要来决定购买。
b．如果处理血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，其红细胞为有核细胞，因此处理量5-20 μl，可加缓冲液GA补足200μl后进行下面的裂解步骤。
c．贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液，然后10000rpm（~11,200×g)离心1 min，倒尽上清，加200μl缓冲液GA，振荡至彻底悬浮；
d．动物组织（脾组织用量应少10 mg）应先打碎处理为细胞悬液，然后10,000rpm（~11,200×g)离心1 min，倒尽上清，加200μl缓冲液GA，振荡至彻底悬浮。
注意：如果需要去除RNA，可加入4 μl RNaseA（100mg/ml）溶液（客户自备，目录号：WH0217），振荡15 sec，室温放置5 min。
2．加入20 μl Proteinase K溶液，混匀。
a．提取血液基因组时，只需加入Proteinase K混匀，即可继续进行下一步。
b．提取细胞基因组时，只需加入Proteinase K混匀，即可继续进行下一步。
c．提取组织基因组时，加入Proteinase K混匀后，在56℃放置，直至组织溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。
注意：不同组织裂解时间不同，通常需1-3 h即可完成（鼠尾需要消化过夜）。不会影响后续操作。每小时颠倒混合样品2-3次，用水浴振荡器也可。
3．加入200μl缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10min，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
注意：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。当血液体积≤200μl且没有采用红细胞裂解处理，或是样本储存条件不佳，水浴后颜色可能为深褐色，注意溶液中没有团块等沉淀。
4．加人200μl无水乙醇，充分振荡混匀15 sec，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5．将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12000rpm （~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。
6．向吸附柱CB3中加入500 μl缓冲液GD （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm （~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
7．向吸附柱CB3中加入600 μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm （~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
8．重复操作步骤7。
9．将吸附柱CB3放回收集管中，12000rpm（~13400×g)离心2 min，倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10．将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μl洗脱缓冲液TE，室温放置2-5 min，12000rpm （~13400×g)离心2 min，将溶液收集到离心管中。
注意：洗脱缓冲液体积不应少于50 μl，体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中，室温放置2 min，12000rpm（~13400×g )离心2 min。
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产品特点：
·简单快速：1h内即可获得超纯的基因组DNA。
·广泛：适用于血液、多种动物细胞和动物组织等。
·超纯：获得的DNA纯度高，可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。
材料用量和纯化核酸得率：
| 样本 | 处理量 | DNA得率（μg) |
| 哺乳动物全血 | 100～500μl | 3～10 |
| 禽类、两栖类全血 | 5μl | 5～10 |
| 培养细胞 | 106～10７Cells | 5～30 |
| 动物组织 | 30mg | 10～30 |
| 小鼠尾 | 1.2cm（尖部) | 10～25 |
| 大鼠尾 | 0.6cm（尖部) | 20～40 |
组织匀浆以及裂解充分图例：
组织取样量图例：
试剂盒组成：
| 组分 | 50T | 200T |
| 缓冲液GA | 15ml | 50 ml |
| 缓冲液GB | 15ml | 52 ml |
| 缓冲液GD | 13 ml | 50 ml |
| 漂洗液PW | 15ml | 50 ml |
| 洗脱缓冲液TE | 15ml | 60 ml |
| Proteinase K | 1 ml | 4×1 ml |
| 吸附柱CB3 | 50个 | 200个 |
| 收集管（2 ml) | 50个 | 200个 |
保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。
选配试剂：红细胞裂解液（Red Cell Lysis Buffer目录号：WH0229)；RNase A（100mg/ml）（目录号：WH0217）
注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇。
2．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3．若缓冲液GA或GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
4．所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。
使用方法：
使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1．处理材料
a．如提取材料为血液，可直接使用200μl新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液，不足200μl可加缓冲液GA补足；
注意：如需处理更大体积血液，如300 μl-1 ml，应按以下步骤操作：在样品中加入3倍体积红细胞裂解液（例如，300 μl血液加入900 μl红细胞裂解液），颠倒混匀，室温放置5 min，期间再颠倒混匀几次。10000rpm（~11500×g)离心1 min（若离心机最高转速不允许，可3000 rpm（~3400×g)离心5 min），吸去上清，留下白细胞沉淀，加200μl缓冲液GA，振荡至彻底混匀。
红细胞裂解液本公司另外有售（目录号：WH0229），可根据需要来决定购买。
b．如果处理血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，其红细胞为有核细胞，因此处理量5-20 μl，可加缓冲液GA补足200μl后进行下面的裂解步骤。
c．贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液，然后10000rpm（~11,200×g)离心1 min，倒尽上清，加200μl缓冲液GA，振荡至彻底悬浮；
d．动物组织（脾组织用量应少10 mg）应先打碎处理为细胞悬液，然后10,000rpm（~11,200×g)离心1 min，倒尽上清，加200μl缓冲液GA，振荡至彻底悬浮。
注意：如果需要去除RNA，可加入4 μl RNaseA（100mg/ml）溶液（客户自备，目录号：WH0217），振荡15 sec，室温放置5 min。
2．加入20 μl Proteinase K溶液，混匀。
a．提取血液基因组时，只需加入Proteinase K混匀，即可继续进行下一步。
b．提取细胞基因组时，只需加入Proteinase K混匀，即可继续进行下一步。
c．提取组织基因组时，加入Proteinase K混匀后，在56℃放置，直至组织溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。
注意：不同组织裂解时间不同，通常需1-3 h即可完成（鼠尾需要消化过夜）。不会影响后续操作。每小时颠倒混合样品2-3次，用水浴振荡器也可。
3．加入200μl缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10min，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
注意：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。当血液体积≤200μl且没有采用红细胞裂解处理，或是样本储存条件不佳，水浴后颜色可能为深褐色，注意溶液中没有团块等沉淀。
4．加人200μl无水乙醇，充分振荡混匀15 sec，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5．将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12000rpm （~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。
6．向吸附柱CB3中加入500 μl缓冲液GD （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm （~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
7．向吸附柱CB3中加入600 μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm （~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
8．重复操作步骤7。
9．将吸附柱CB3放回收集管中，12000rpm（~13400×g)离心2 min，倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10．将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μl洗脱缓冲液TE，室温放置2-5 min，12000rpm （~13400×g)离心2 min，将溶液收集到离心管中。
注意：洗脱缓冲液体积不应少于50 μl，体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中，室温放置2 min，12000rpm（~13400×g )离心2 min。
相关搜索：广谱基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)，哺乳动物全血基因组DNA提取试剂盒，禽类全血基因组DNA提取试剂盒，两栖类全血DNA提取试剂盒，动物培养细胞基因组DNA提取试剂盒，动物组织基因组DNA提取试剂盒